目的:通过静电纺丝纳米技术制备纳米丝素蛋白仿生矿化膜,利用共培养法复合BMSCs,研究复合材料植入SD大鼠横突间促进脊柱后外侧融合情况。
方法:
(1)利用静电纺丝技术制备纳米丝素蛋白膜后置入10倍模拟体液中制备纳米丝素蛋白仿生矿化膜,并对材料行扫描电镜(SEM)、X线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱分析(FTIR)来进行表征,采用MTT比色法来检测支架材料对成骨细胞增殖的影响,评价支架材料的细胞毒性;
(2)建立SD大鼠股骨肌袋模型,随机分为2组,A组:大鼠左侧肌袋植入单纯纳米丝素蛋白,右侧植入单纯纳米丝素蛋白+骨髓间充质干细胞;B组:左侧肌袋植入纳米丝素蛋白仿生矿化膜,右侧植入纳米丝素蛋白仿生矿化膜+骨髓间充质干细胞;术后2、4、6、8周处死大鼠,行组织形态学检查;
(3)建立SD大鼠脊柱后外侧融合模型,随机分为6组,Ⅰa:纳米丝素蛋白膜,Ⅰb:纳米丝素蛋白膜复合BMSCs,Ⅱa:纳米丝素蛋白仿生矿化膜,Ⅱb:纳米丝素蛋白仿生矿化膜复合BMSCs,Ⅲ:髂骨,Ⅳ:空白对照组,术后4、8、12周拍Micro-CT观察骨融合情况,术后12周对融合阶段行手触诊法检测融合情况,并进行组织切片检查。
结果:
(1)复合材料通过SEM、XRD和FTIR检测证实所制备的复合材料中成分为丝素蛋白和羟基磷灰石,复合材料对成骨细胞无毒性;
(2)纳米丝素蛋白仿生矿化膜具有一定异位成骨性能,复合BMSCs后异位成骨性能增强,纳米丝素蛋白膜无论复合BMSCs否,都无异位成骨能力;
(3)纳米丝素蛋白仿生矿化膜有利于SD大鼠横突间融合,复合BMSCs后,促融合能力增强。
结论:纳米丝素蛋白仿生矿化膜无细胞毒性,有一定的骨诱导性,有异位成骨、促SD大鼠脊柱后外侧融合作用,复合BMSCs后作用增强。
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