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J.Biomed.Mater.Res.:肝素-透明质酸纳米纤维用于在脊髓修复中隔离生长因子

 
发布日期:2020-04-29     来源:易丝帮
 

DOI: 10.1002/jbm.a.36962

生长因子(GF)递送是脊髓损伤修复的常见策略,但是,GF的降解会阻碍长期治疗。众所周知,通过肝素隔离GF可以保护递送后的生物活性。研究者测试了两种肝素修饰物,甲基丙烯酸肝素和巯基化肝素,并与甲基丙烯酸透明质酸(MeHA)进行静电纺丝形成了HepMAHA和HepSHHA纳米纤维。对于负载条件,将MeHA、HepMAHA和HepSHHA纤维与可溶性bFGF或NGF孵育,并用PBS冲洗。对照组在PBS中水合。在生长培养基或补充bFGF的培养基中培养24小时后,分析了L929成纤维细胞的增殖情况。在无血清培养基(SFM)或补充NGF的SFM(SFM+NGF)中培养三天后,测量解离的鸡背根神经节神经突。在生长培养基中,与其他组相比,负载的HepMAHA中成纤维细胞增殖显著增加(α<0.05)。在SFM中,与所有其他组相比,负载的HepMAHA的平均神经突长度最长。在SFM+NGF中,与MeHA相比,HepMAHA和HepSHHA的神经突长度增加,无论负载量如何(α<0.01),这表明可溶性NGF的主动隔离。HepMAHA是一种在脊髓损伤环境中隔离释放GFs的有希望的生物材料,并且可以与GF填充的微球结合用于未来研究。

 

image.png

图1:电纺纳米纤维的扫描电子显微照片。A:MeHA,B:HepMAHA,C:HepSHHA。比例尺为10μm。显微照片显示,在不同类型的纤维中,具有类似结构的平滑定向纳米纤维。D:显示纳米纤维浓度的表格。显示三种纤维类型的纳米纤维排列和纤维直径。纤维排列是指在30度范围内的纤维百分比,其中发现了纤维百分比最高的频带。纤维直径是平均值±标准偏差。N=5个SEM图像。(缩写:纳米,nm)


image.png

图2:在存在肝素修饰纳米纤维的情况下,L929成纤维细胞的增殖,以alamarBlue的百分比减少表示;随着细胞的增殖,alamarBlue试剂会减少,据报道可近似于细胞增殖。将负载的纤维暴露于100 ng/ml bFGF,然后在细胞培养之前用PBS漂洗7次。黑色误差条表示标准偏差。A:在生长培养基中,负载的HepMAHA与所有其他条件显著不同(*,p<0.05)。B:在补充FGF的培养基中,负载的HepMAHA与负载的HepSHHA显著不同($,p<0.05)。

图3:在存在肝素修饰纳米纤维的情况下,用A:SFM和B:SFM+NGF培养的平均神经突长度。将负载的纤维暴露于100 ng/ml NGF,然后在细胞培养之前用PBS漂洗7次。误差条表示标准偏差。*表示肝素-透明质酸的生长因子隔离条件与所有其他条件显著不同(p<0.01)。#表示肝素-透明质酸的生长因子隔离条件与负载的MeHA显著不同(p<0.01)。$表示肝素-透明质酸的生长因子隔离条件与负载的HepSHHA显著不同(p<0.01)。+表示肝素-透明质酸的生长因子隔离条件与负载的HepMAHA显著不同(p<0.01)。


image.png

图4:抗神经丝和FITC显示的纤维上的突起延伸示例。所有图像都遵循右上角的100μm比例尺。A至F是在SFM中生长的神经突。G到L是在SFM+NGF中生长的神经突。神经突在MeHA(A,G)、HepMAHA(B,H)、HepSHHA(C,I)、负载的MeHA(D,J)、负载的HepMAHA(E,K)、负载的HepSHHA(F,L)上生长。

链接地址:http://www.espun.cn/News/Detail/43253

文章来源:易丝帮

 
 
 

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